化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA),是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。化學發光免疫分析儀包含兩個部分，即免疫反應系統和化學發光分析系統。化學發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發態的中間體，當這種激發態中間體回到穩定的基態時，同時發射出光子(hM),利用發光信號測量儀器測量光量子產額。免疫反應系統是將發光物質（在反應劑激發下生成激發態中間體）直接標記在抗原（化學發光免疫分析）或抗體（免疫化學發光分析）上，或酶作用于發光底物。

1、化學發光標記免疫分析法

化學發光標記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA),是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridin ium ester(A E),是有效的發光標記物[3],其通過起動發光試劑(N aOH2H2O 2)作用而發光,強烈的直接發光在一秒鐘內完成,為快速的閃爍發光(見圖1)。吖啶酯作為標記物用于免疫分析,其化學反應簡單、快速、無須催化劑;檢測小分子抗原采用競爭法,大分子抗原則采用夾心法,非特異性結合少,本底低;與大分子的結合不會減小所產生的光量,從而增加靈敏度。

2、發光酶免疫分析法

從標記免疫分析角度,化學發光酶免疫分析(chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA),應屬酶免疫分析,只是酶反應的底物是發光劑,操作步驟與酶免分析完全相同[5]:以酶標記生物活性物質(如酶標記的抗原或抗體)進行免疫反應,免疫反應復合物上的酶再作用于發光底物,在信號試劑作用下發光,用發光信號測定儀進行發光測定。目前常用的標記酶為辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(AL P),它們有各自的發光底物。

1979年，芬蘭Wallac公司研發部的Soini和Hemmila首次提出了建立稀土離子標記物的“時間分辨熒光免疫分析”理論。

1983年，Soini和Kojola首先開發出以鑭系元素為示蹤物的時間分辨熒光測量儀，建立了新的非放射性微量分析檢測技術。同一年，Pettersson等人運用此儀器首次對人絨膜促性腺激素（hCG）進行了時間分辨熒光免疫分析。

1984年，Hemmila確定了DELFIA（解離增強鑭系元素熒光免疫檢測）這種時間分辨免疫分析技術方案，從而使DELFIA成為Wallac的專利技術。

1988年，加拿大CyberFluor公司的Diamandis創立了一種不同于DELFIA的時間分辨熒光免疫分析，即FIAgen（采用的是以Eu3+螯合物配基BCPDA為標記物，通過檢測其與過量Eu3+形成的螯合物熒光進行定量）。

我國起步相對晚一些，在2003年，時間分辨熒光分析技術獲得國家科技進步二等獎。

免疫分析儀適用范圍該產品使用VITROS試劑采用體外定量、半定量及定量測量的方法對臨床生化、免疫項目進行檢測。

SMCTM技術在獲得最優化的免疫檢測效力的同時，操作流程其實相當簡便，與傳統的ELISA很相似，通過整合獨特的洗脫步驟和靈敏的數字化檢測，SMCTM技術相較于傳統免疫檢測技術，信噪比有了很顯著的改善，使得我們可以在一個系統里同時檢測低表達和高表達的蛋白靶標。

優點：使用鑭系元素作為標記物，其在保證檢測的靈敏度和特異性的基礎上，通過時間分辨技術消除了背景熒光的干擾。檢測多種抗原時可使用多種熒光素進行標記抗體，且靈敏度（標記物為Eu3+的檢測靈敏度為10-18mol/well）和特異性均較高，較其他分析方法好。還有標準曲線劑量范圍寬、自動化程度高、操作簡便等許多優點。

缺點：試劑盒昂貴和易受內源性或外源性稀土離子的污染

1.使用環境：將儀器置于水平、穩固、潔凈的地方。自然環境中稀土離子存在十分廣泛，如空氣灰塵和煙霧中，均有不同程度的含量，尤以北方地區為甚，所以應建立一個相對無塵的操作環境，防止器材、試劑和操作者在操作中不慎可能造成的污染。

2.操作時按照實驗室安全工作準則，戴手套穿工作服，不得戴首飾，以避免潛在的危險；在實驗中應該注意用電安全，不得觸及帶電部分；標本及其他廢棄物的處理應遵守實驗室相關規定，注意生物安全。

3.嚴格遵守操作規程，如儀器出現故障，立即向管理責任人或科室負責人報告，查明原因，及時處理，不得擅自“修理”，應登記“儀器設備使用登記”本。

4.當儀器不處于STANDBY或關機狀態時，不能觸及加樣針、攪拌棒等儀器運動部分。

5.將血清標本吸入樣品杯時，避免產生氣泡或吸入凝塊。

6.銪標記物是提高靈敏度、降低非特異性結合的關鍵，受標記方法、抗體濃度、稀土元素或其螯合物質量及標記中帶來不均一性影響，每批標記物質量都有一定的差異，因此不同批號標記物敏感性不一，不能混用，且每次測定都需作標準曲線。

7.時間分辨熒光免疫分析技術的免疫反應與其他免疫反應的條件一樣，易受pH、溫度、時間等因素的影響。且TRFIA的免疫反應是在室溫狀態下不斷振蕩完成的，所以反應的室溫等環境影響因素應嚴格控制。

8.TRFIA技術由于靈敏度極高，許多因素能夠影響其準確度，因此在每一步的操作中都應嚴格按照操作規程進行操作。