乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）產(chǎn)品說明:

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：康珠生物乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：Japanese encephalitis virus IgG antibody detection kit (ELISA)

【包裝規(guī)格】

96人份／盒?，48人份／盒。

【預期用途】

本產(chǎn)品用于體外定性檢測人體血清、血漿或指尖末梢血中的乙型腦炎病毒IgG抗體。

流行性乙型腦炎是乙型腦炎病毒經(jīng)庫蚊傳播而使人體感染的一種傳染性疾病，感染患者以2-6歲兒童居多，病死率較高為5%-20%。人體感染該病毒后，能引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，發(fā)生腦炎而俗稱乙型腦炎，應用乙型腦炎抗體的穩(wěn)定，很少變異的特點。預防免疫效果良好，所以通過免疫接種乙型腦炎病毒疫苗，使機體產(chǎn)生乙型腦炎病毒IgG抗體，達到乙型腦炎的預防效果。

【檢驗原理】

本試劑盒采用酶聯(lián)免疫間接法原理，用經(jīng)滅活純化的乙型腦炎病毒抗原包被酶標板制備固相抗原，樣本中乙型腦炎病毒IgG抗體與包被抗原反應，再與辣根過氧化物酶標記的鼠抗人IgG結合,?形成抗原-抗體-酶標抗體復合物，加入底物TMB后產(chǎn)生顯色反應，加入終止液后經(jīng)酶免分析儀測定OD值，再與臨界值比較以判定樣本中是否含有乙型腦炎病毒IgG抗體。

【主要組成成份】

本試劑盒由反應板、酶結合物、陽性對照、陰性對照、濃縮洗滌液、顯色液A、顯色液B、終止液、樣品稀釋液、自封袋和封片組成：

【儲存條件及有效期】

試劑盒應置2～8℃保存，有效期為十二個月。

生產(chǎn)日期、有效期至：見包裝標簽。

【適用儀器】

酶免分析儀(檢測波長450nm,參考波長630nm)、洗板機、37℃恒溫水浴箱、移液器、振蕩器。

【樣本要求】

1.?血清樣本按常規(guī)方法由靜脈采集。血漿樣本可采用常規(guī)用量的抗凝劑（EDTA-2Na: 12g/L、肝素:15000IU/L、枸椽酸鈉：3.2g/L、草酸鈉: 0.01mol/L（1.34g/L））抗凝。

2.樣本應新鮮，避免反復凍溶及溶血。樣本可在2-8℃保存一周，長期保存應于-20℃條件下儲存。

3.指尖末梢血樣本按照常規(guī)方法采集，指尖末梢血樣本可采用常規(guī)用量的抗凝劑（EDTA-2K）抗凝。指尖末梢血樣本取20μL加入樣本稀釋液120μL，靜置取上清液。

【檢驗方法】

加樣：加血清或血漿樣本時每孔先加入樣本稀釋液100μL，再加入待測樣本10μL，輕輕振勻。或者加指尖末梢血樣本時，取20μL加入樣本稀釋液120μL，輕搖混勻，置室溫或2～8℃冰箱靜置，待紅血球全部沉降到管底后取上清液進行檢測，每孔加入上清液100μL，輕輕振勻。

每次試驗設陰性對照、陽性對照各2孔，每孔加入相應對照血清100微升，并設空白對照1孔(暫不加任何液體)。

2.溫育：用封片封板后，37℃溫育60分鐘。

3.洗板：將濃縮洗滌液用純化水或雙蒸水稀釋20倍，設定洗板5次程序，每次浸泡時間為（30～60）秒，洗板結束后在吸水紙上拍干。

4.加酶：除空白對照孔外，每孔加入酶結合物50微升。

5.溫育：用封片封板后，37℃溫育30分鐘。

6.洗板：同步驟3。

7.顯色：每孔加入顯色液A、顯色液B各50微升，用封片封板后，輕輕振勻，37℃避光顯色15分鐘。

8.終止：每孔加終止液50微升，輕輕振勻。

9.測OD值：對空白對照調零，在酶標儀450nm處測定OD值，或在雙波長450nm/630nm處測定OD值。

10.結果分析：當使用單波長（450nm）測定時應扣除空白值，當使用雙波長測定不應扣除空白值。

【參考值（參考范圍）】

臨界值?cutoff value=0.10+陰性對照平均值（不到0.05按0.05算，超過0.05按實際值平均值計算。）

【檢驗結果的解釋】

樣本OD值＜臨界值時，為陰性結果：表示待測樣本中未檢出乙型腦炎病毒IgG抗體；

樣本OD值≥臨界值時，為陽性結果：表示待測樣本標本中檢出乙型腦炎病毒IgG抗體，說明既往感染或已經(jīng)過乙型腦炎疫苗的計劃免疫。

【檢驗方法的局限性】

1.高靈敏度的免疫實驗方法，存在潛在的非特異性反應。

2.檢測高度溶血的樣本和有微生物污染的樣本時可能會有錯誤的結果。

3.本檢測結果僅供臨床參考，如需確診病例請結合臨床癥狀及其他檢測手段，不得作為臨床診斷的唯一標準。